Am folosit compusul obţinut în reacţia anterioară într-o reacţie de cuplaj amidic cu o lizină protejată la funcţiunea amino din poziţia α cu o grupare Fmoc (o grupă protectoare foarte des întâlnită în sinteza de peptide, grupă ce se desprotejează doar în mediu bazic). Am cântărit 150 mg de compus sintetizat iniţial şi cca 275 mg de Fmoc-Lys-OH, le-am introdus într-un balon, am adăugat o cantitate nu prea mare de solvent (DMF, dimetilformamida) şi 230 mg de DCC (diciclocarbodiimidă, folosită pentru a scoate apa din reacţie). Existenţa unui mediu anhidru a fost o condiţie pentru ca reacţia să meargă. Am lăsat amestecul la agitare magnetică.
Reacţia ce are loc este următoarea:
Din nou, pentru a confirma faptul că reacţia are loc, am realizat cromatografie în strat subţire după o oră şi jumătate.
Plăcuţa cromatografică:
Am notat compusul obţinut cu B; spotul corespunzător s-a deplasat, ceea ce confirmă desfăşurarea reacţiei.
Am calculat Rf:
2,9cm/3,2cm = 0,9
Şi de această dată am lăsat compuşii să reacţioneze peste noapte, după care am oprit reacţia şi am filtrat rapid la vid precipitatul format pentru a evita retenţia de apă din aer.
Am obţinut un precipitat alb ceva mai fin decât compusul obţinut din prima sinteză:
Am îndepărtat compusul de pe hârtia de filtru:
Pentru a confirma structura propusă, după purificare am realizat analiza H1RMN a produsului rezultat.
Am obţinut următorul spectru:
Interpretare:
• Cele 4 semnale din regiunea 7-8 ppm corespund protonilor din grupa protectoare Fmoc
• Cele 2 semnale mici şi largi din regiunea 6,5-7 ppm corespund protonilor NH amidici
• Singletele din regiunea 5-5,5 ppm sunt ale protonilor din CH2=
• Semnalele largi de la 4-4,3 ppm corespund CH2 din Fmoc, CH din lizină şi CH din Fmoc
• Semnalul de la 3,1 ppm corespunde CH2 de la restul de acid aminocaproic de lângă CO• Semnalul de la 2 ppm corespunde CH2 de langa NH amidic de pe acidul aminocaproic
• Singletul de la 1,8 ppm corespunde protonilor CH3
• Restul semnalelor (1,1-1,9 ppm) corespund CH2 din lizină şi din acidul aminocaproic
